革兰染色为细菌的分类、鉴定和研究提供了有力工具

革兰染色为细菌的分类、鉴定和研究提供了有力工具

革兰染色，也称革兰氏染色，是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，由丹麦医师、细菌学家Christain Gram于1884年创立‌‌。

‌一、原理‌

革兰氏染色法能将细菌分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）两大类，这是由两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的。革兰氏阳性菌细胞壁较厚，肽聚糖含量高，交联度大，脂质含量少，用乙醇脱色时，肽聚糖层网孔变小，结晶紫碘复合物不易被洗脱，仍保留在细胞内，最终呈紫色；而革兰氏阴性菌细胞壁较薄，肽聚糖含量低，交联度小，脂质含量高，用乙醇脱色时，脂质被溶解，细胞壁通透性增加，结晶紫碘复合物容易被洗脱，细胞最终呈红色‌‌。

‌二、步骤‌

革兰氏染色的步骤通常包括：

涂片：取洁净的载玻片，在中央滴一滴无菌水，用接种环挑取少量细菌培养物，在水滴中混匀并涂成薄而均匀的涂片‌。

干燥：自然干燥或在酒精灯火焰上方微微加热干燥‌2。

固定：将涂片通过火焰3次，使细菌固定在载玻片上‌2。

初染：滴加结晶紫染液，染色1-2分钟，水洗‌2。

媒染：滴加碘液，作用1分钟，水洗‌2。

脱色：用95%乙醇脱色20-30秒（或至无紫色脱落为止），立即水洗‌25。

复染：滴加沙黄（或蕃红）染液，染色1分钟，水洗，吸干后镜检‌2。

‌三、结果及意义‌

通过革兰氏染色，细菌可以被分为两类：不被酒精脱色仍保留紫色者为革兰阳性菌；被酒精脱色后复染为红色者是革兰阴性菌。这种分类方法对于细菌的形态鉴定、菌种鉴定以及研究细菌对抗生素的敏感性、选择抗菌药物等具有重要意义‌‌。

革兰染色是一种重要的细菌鉴别染色法，通过它可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，为细菌的分类、鉴定和研究提供了有力工具。